会有些影响，在活率方面。70%的细胞应该没问题。
1）传统方法: 冻存管置于4℃ 40min--->-20℃ 30min--->-80℃ 16～18h
(或隔夜)--->液氮中长期储存。
注意：-20℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
（2）程序降温：利用已设定程序的程序降温仪以-1～-3℃/min的速度由室温降至（-80℃以下）-120℃，再放在液氮中长期储存。
没事啊，正常步骤就应该4摄氏度2h，-20摄氏度2h，-80摄氏度2h，然后放液氮罐。
没事 只要不染菌
323232325飞
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